荧光原位杂交(石蜡切片)

       荧光原位杂交（FISH）是一种使用仅与染色体的那些部分高度序列互补性结合的荧光探针的分子细胞遗传学技术。它是由生物医学研究人员在20世纪80年代初开发的，用于检测和定位染色体上特定DNA序列的存在与否。荧光显微镜可用于找出荧光探针与染色体结合的位置。FISH通常用于发现DNA中的特定特征，用于遗传咨询，药物和物种鉴定。FISH也可用于检测和定位细胞，循环肿瘤细胞和组织样品中特定的RNA靶标（mRNA，lncRNA和miRNA）。

  一、试剂配制

  1.变性液：甲酰胺70%；2×SSC；0.1mM EDTA。

  2.杂交缓冲液：300ul甲酰胺；12ul 50×Denhardts；120ul 50%葡聚糖硫酸酯；；10ul RNA探针及49ul的无RNA酶的去离子水。

  3.20×SSC：175.3g/L氯化钠；88.2g/L的柠檬酸钠；调pH值7.0；高压蒸汽灭菌备用，使用时按照需求进行稀释。

  4.WS-Ⅰ：甲酰胺50%(V/V)；20×SSC 10%(V/V)；DEPC水40%(V/V)。

  5.WS-Ⅱ：4×SSC；0.05%Tween-20

  6.WS-Ⅲ：4×SSC

  以上所有试剂均用0.1%的DEPC水（焦炭酸二乙酯）配制。